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近日，中國(guó)科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所研究員王方軍團(tuán)隊(duì)發(fā)展了整合紫外激光解離的時(shí)間分辨質(zhì)譜法，實(shí)現(xiàn)了對(duì)氨基酸位點(diǎn)突變引起的靶蛋白穩(wěn)定性和動(dòng)態(tài)精細(xì)結(jié)構(gòu)的表征，為研究靶蛋白氨基酸突變的病理機(jī)制提供了新技術(shù)。相關(guān)成果發(fā)表在《美國(guó)化學(xué)會(huì)志》上。

氨基酸位點(diǎn)突變?nèi)绾斡绊懓械鞍追€(wěn)定性和動(dòng)態(tài)結(jié)構(gòu)，對(duì)于理解疾病的分子機(jī)制，以及靶向藥物設(shè)計(jì)至關(guān)重要。然而，位點(diǎn)突變通常只能引起靶蛋白動(dòng)態(tài)結(jié)構(gòu)的細(xì)微變化，對(duì)其動(dòng)態(tài)分子細(xì)節(jié)的表征仍面臨極大的挑戰(zhàn)。

研究團(tuán)隊(duì)采用在線(xiàn)混合甲酸溶液引起靶蛋白結(jié)構(gòu)去折疊的方法，通過(guò)非變性電噴霧離子化和質(zhì)譜分析，監(jiān)測(cè)了蛋白質(zhì)去折疊中間體和產(chǎn)物的電荷分布，以及其相對(duì)豐度隨混合時(shí)間的變化。此外，團(tuán)隊(duì)進(jìn)一步采用紫外激光解離和碎片離子質(zhì)譜定量方法，對(duì)突變體和野生型二氫葉酸還原酶的去折疊中間體進(jìn)行了動(dòng)態(tài)結(jié)構(gòu)和分子細(xì)節(jié)的對(duì)比。